新生儿溶血病的实验诊断是指通过实验室检查进行新生儿溶血病的诊断，包括产前诊断及产后诊断。实验室检查包括母体针对胎儿的免疫性抗体、婴儿血清中血型抗体及其类型、羊水胆红素测定等。

1.血型检查

（1）ABO血型检测：检查夫妻双方及胎儿的ABO血型，可初步判断有无血型不合。妊娠者如为O型，配偶为A、B、AB型者，可能发生ABO溶血，应进行特异性抗体检查。

（2）Rh血型检测：妊娠者为Rh阴性，配偶为Rh阳性时，可能引起Rh溶血。

2.血清抗体检查

常用的检测方法有妊娠者的血进行释放试验、游离抗体试验、红细胞直接抗人球蛋白试验（DAT）、母体ABO系统以外的抗体筛选及血清中IgG抗体效价测定。对妊娠者血清中IgG抗A或抗B效价＞1:64且无流产病史及新生儿溶血病史时，可每4周检查一次抗体浓度；ABO抗体效价≥1:256为可疑；ABO抗体效价≥1：512为高度可疑，如有既往史则建议行换血治疗。Rh抗体效价≥1:8为可疑，建议复查；当Rh抗体效价≥1:16，可考虑羊膜穿刺术进一步检测羊水胆红素含量。

3.基因型检查

从羊水、脐血或绒毛膜等处获取胎儿组织细胞，通过聚合酶链式反应（PCR）测定胎儿血型基因可评估发生新生儿溶血病的概率。经皮脐血采样及绒毛膜取样会增加胎儿溶血、母体致敏、流产及死胎的可能，应慎重进行。

3.羊水胆红素检查

羊膜腔穿刺可获得羊水，用分光光度计测定羊水在450mm处的光密度与羊水中胆红素含量有关。根据孕周和羊水胆红素ΔOD450区，可间隔1~2周重复穿刺对胆红素水平进行监测，羊水胆红素水平可更准确的反映胎儿受累程度。基于测定结果可选择宫内输血或终止妊娠。

4.新生儿相关检查

（1）血常规检查：血细胞分析可见血红蛋白及红细胞数量下降，网织红细胞百分比常高于10%，重症者可见血小板减少。

（2）血涂片检查：血涂片可见大量核红细胞（＞10个/100白细胞）。

（3）血液生化检查：血清总胆红素和间接胆红素含量明显升高，碱性磷酸酶含量升高，血浆白蛋白含量下降。

（4）直接Coombs试验：此试验阳性结果有确诊意义。ABO溶血症以“最适合稀释度抗人球蛋白血清”作抗体释放试验可获得阳性结果，Rh溶血症的Coombs直接和间接试验均可呈阳性。

（5）抗体试验：抗体释放试验是检测致敏红细胞的敏感试验，也是确诊试验。游离抗体试验有助于判断患儿是否存在持续溶血或作为换血治疗后评价指标。抗人球蛋白间接试验（IAT）可明确抗体类型。抗体试验可用流式细胞仪进行检测，敏感度高、特异性强。

（6）凝血功能检查：患儿可有出血时间延长，血块收缩不良，纤维蛋白原（Fib）和凝血酶原降低。

（7）红细胞乙酰胆碱酯酶活性测定：ABO溶血时其活性明显降低。

（8）尿胆原检测：尿液及粪便中尿胆原均增加。如发生胆道阻塞，粪便可呈灰白色，尿胆红素强阳性。

产前进行血型测定可初步了解是否可能发生新生儿溶血病，血型抗体效价、羊水胆红素测定、基因检测结合超声检查可较为明确的了解胎儿情况、评估新生儿溶血病发生可能性，为及时换血治疗或终止妊娠提供决策依据。产后通过血型鉴定、抗体试验、血液检查等可明确诊断，了解病因，同时通过实验室检查动态监测血液指标可评估治疗效果。因此新生儿溶血病的实验诊断不仅可明确疾病诊断，同时可以为鉴别诊断、治疗效果评价提供参考。