肺炎支原体基因扩增检测是一种通过聚合酶链式反应（PCR）对肺炎支原体的靶基因进行扩增的分子生物学方法。该检测方法快速、敏感和特异性均较高。

肺炎支原体基因扩增检测敏感性为73%，特异性为94%，可准确检测出肺炎支原体，且方便快捷，应向患者说明此检测的意义和必要性，获得患者理解和同意。而后获取标本，一般为受检者咽拭子或痰液。应在获取标本前进行口腔消毒，并注意标本的无菌处理以及送检时间。

目前肺炎支原体基因扩增检测可通过常规PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR、多重PCR等方式进行检测。其中常规PCR检测肺炎支原体常用靶基因为16S rRNA、16~23S的内间隔转录区(ITS)、23SrRNA的5’末端及Pl基因；巢式PCR检测肺炎支原体的靶基因与普通PCR相同，通过内侧引物和外侧引物的两次扩增进行检测，其敏感度为普通PCR的23倍，假阴性率低2倍。实时荧光定量PCR用于检测肺炎支原体的主要方法为探针法，常以肺炎支原体的ATPase操纵子基因、Pl黏附素基因、RepMpl和CARDS基因为靶点设计引物和探针。

各类PCR的基本步骤包括以下步骤。

1.核酸获取

通过加入裂解剂、孵育、反复清洗、离心等步骤去除核酸之外的杂质。

2.PCR

通过加入引物等配置反应体系、设定PCR循环及使用PCR仪进行反应对靶基因进行扩增。

3.电泳

对扩增产物进行凝胶电泳并进行检测，确定标本中是否有靶基因，如果没有则结果为阴性。

PCR结果为阴性。

肺炎支原体是经呼吸道传播的原发性非典型肺炎和急性呼吸道感染的重要病原体，其感染常见于儿童及青少年，占非细菌性肺炎的1/3以上，同时可引起严重的肺外并发症如脑膜炎、脊髓炎、心肌炎等。肺炎支原体传统检测方法中分离培养需要时间长、阳性率很低，免疫学方法由于存在交叉抗原导致假阳性率增加，血清学检查仅提示抗体滴度变化。而肺炎支原体基因扩增检测有需要标本量少、检测快速、操作简单、特异性和灵敏度高的特点，能够早期检测感染并可监测治疗效果、进行耐药性分析，为临床提供诊断依据和用药指导，是临床早期诊断肺炎支原体感染最有价值的方法。